Kit ForeDirect RT-qPCR
Descrição
O kit ForeDirect RT-qPCR foi projetado para amplificação direta de RNA em tempo real a partir de coletas de swab sem processos de purificação de RNA.Este kit completa os ciclos qRT-PCR em uma hora.A mistura de enzimas é uma mistura otimizada de transcriptase reversa, polimerase de DNA Hot-Start Taq, inibidor de RNase.O Reaction Buffer contém todos os componentes necessários, incluindo componentes de buffer otimizados, Mg2+, dUTP e dNTPs.
Especificações
100T
Componentes do kit
Agente de liberação de ácido nucleico |
protetor de RNA |
2× Tampão RT-qPCR |
Mistura Enzimática (Taq&M-MLV) |
Instruções |
Pedido de PCR
1. Assim que os tubos de reação de PCR tiverem sido centrifugados brevemente, coloque-os no tanque de amostras do instrumento de amplificação.
2. Protocolo térmico
Etapa | Temperatura | Tempo | ciclos | |
1 | Transcrição reversa | 50℃ | 15 minutos | 1 |
2 | Pré-desnaturação | 95℃ | 1 minuto | 1 |
3 | Desnaturação | 95℃ | 10 segundos | 42 |
4 | Recozimento/Extensão | 60℃ | 30 segundos |
Observação:O sinal fluorescente foi detectado imediatamente após a etapa de extensão de cada ciclo.
3. Após a configuração, salve o arquivo e execute o programa de reação.
Etapas operacionais
Antes da preparação dos reagentes, todos os reagentes do kit devem ser descongelados à temperatura ambiente e misturados suavemente.
Preparação de reagentes
1. Prepare a Mistura de Liberação de Ácido Nucleico
Componente | Volume por Amostra ou Controle |
Agente de liberação de ácido nucleico | 5μL |
protetor de RNA | 0,5 μL |
2. Prepare a mistura de reação
Componente | Volume por Amostra ou Controle |
2× Tampão RT-qPCR | 15 μL |
Mistura Enzimática (Taq&M-MLV) | 1,5 μL |
Primers e Sondas | 1μL |
Armazenamento e prazo de validade
-O kit deve ser armazenado em -20± 5℃.O prazo de validade é de 12 meses.
-Evite ciclos repetidos de congelamento-descongelamento (<5 ciclos).