Kit de PCR direto de tecido animal-UNG (sem ferramentas de amostragem) Protocolo
Descrição do kit:
Use diretamente o lisado de tecido animal como modelo para amplificação por PCR, sem extração separada de DNA, rápida e de alta sensibilidade.Adicionado sistema antipoluição UNG para eliminar falsos positivos.
◮Nenhuma purificação de DNA demorada e cara é necessária.
◮A demanda de amostra é pequena, basta pegar uma única semente.
◮Não são necessários tratamentos especiais, como moagem e trituração, e a operação é simples.
◮O sistema de PCR otimizado permite que a PCR tenha maior especificidade e tolerância mais forte aos inibidores da reação de PCR.
Descrições
Este kit usa um sistema tampão de lise exclusivo para liberar rapidamente o DNA genômico de amostras de tecido animal para reações de PCR, por isso é particularmente adequado para testes genéticos em larga escala.
O processo de liberação do DNA genômico do tampão de lise é concluído em 10-30 minutos a 65°C.Nenhum outro processo, como remoção de proteínas e RNA, é necessário, e o traço de DNA liberado pode ser usado como modelo para a reação de PCR.
2×PCR fácilTMMix (UNG) usa dUTP em vez de dTTP com base em 2×PCR EasyTMMisture e adicione a enzima UNG (Uracil-N-glicosilase) que pode degradar o molde contendo dUTP ao mesmo tempo.Antes da reação de PCR, a enzima UNG é usada para degradar o produto de PCR contendo uracil.A enzima UNG não terá nenhum efeito sobre o molde que não contém uracil, garantindo assim a especificidade e precisão da amplificação e evitando a possibilidade de contaminação de produtos de PCR durante testes genéticos em larga escala.
D-Taq DNA polimerase é uma DNA polimerase especialmente desenvolvida pela Foregene para reações diretas de PCR.A D-Taq DNA polimerase tem forte tolerância a uma variedade de inibidores de reação de PCR e pode amplificar com eficiência vestígios de DNA em vários sistemas de reação complexos, e a velocidade de amplificação pode atingir 2Kb/min, o que é especialmente adequado para reação de PCR direta.
Componentes do kit
| Parte I | Tampão AL |
| Foregene Protease | |
| Tampão de Carregamento de DNA 6× | |
| parte II | 2×PCR fácilTMMisturar (UNG) |
Características&vantagens
■Nenhuma purificação de DNA demorada e cara
■ A demanda de amostras é pequena, apenas 5 mg de tecido animal podem ser testados.
■ Nenhum tratamento especial, como moagem e trituração, é necessário, e a operação é simples.
■ O sistema de PCR otimizado faz com que o PCR tenha maior especificidade e tolerância mais forte aos inibidores da reação de PCR.
■ Sistema de PCR antipoluição 2×PCR fácilTMMix (UNG) elimina efetivamente a poluição causada por produtos de PCR e garante a especificidade e precisão da amplificação.
Parâmetros do kit
Aplicação: uma variedade de tecidos animais.
DNA liberado da lise da amostra: usado apenas como modelo de PCR.
O kit pode ser utilizado para as seguintes finalidades: identificação de transgenose, genotipagem animal, etc.
fluxo de trabalho
Armazenamento e prazo de validade
A parte I deste kit deve ser armazenada em 2-8℃.
O reagente Buffer AL pode ser armazenado por 12 meses em local seco;pode ser armazenado em 2-8℃para um armazenamento mais longo.
Reagente Foregene Protease tem uma fórmula única.Para garantir sua atividade e estabilidade, armazene-o em 4℃por 12 meses.
Reagente 6×O DNA Loading Buffer pode ser armazenado a 4℃ou -20℃por muito tempo.
A parte II deste kit deve ser armazenada a -20℃.
Reagente 2×PCR fácilTMMix(UNG), se for usado com frequência, também pode ser armazenado em 4℃para armazenamento de curto prazo (consumir em 10 dias).
