Kit RT-qPCR direto
Descrição do kit:
◮ O kit Direct RT-qPCR, usando Foreasy Reverse Transcriptase e Foreasy HS Taq DNA Polymerase desenvolvido pela Foregene, com tampão de reação exclusivo, torna este kit com forte resistência e compatibilidade, e pode testar diretamente a reação usando o sistema Foregene Lysis como modelo.Este kit pode ser aplicado ao kit de detecção de ácido nucleico COVID-19 e ao desenvolvimento do kit de detecção de ácido nucleico de outras bactérias patogênicas.
Descrição
O kit Direct RT-qPCR fornece tampão RT-qPCR embalado separadamente e enzima de alta eficiênciamistura (Taq、M-MLV、RI), tornando-o conveniente para a criação de kits de back-end e sistemaajuste, dentro de verificação simples.
Especificações
500T, 50.000T
Componentes do kit
| Conteúdo do kit (sistema de reação de 20 μL) | IM-05111-01 | IM-05112-01 |
| 500T | 50.000 T | |
| Mistura Enzimática Direta | 500 μL×1 | 50 mL×1 |
| 2× Buffer RT-qPCR Direto | 1 mL×5 | 500 ml×1 |
| Instrução | 1 | 1 |
Etapas operacionais
Antes da preparação dos reagentes, todos os reagentes do kit devem ser descongelados à temperatura ambiente e misturados suavemente.
A: Preparar of modelo e reagente
1. Prepare o modelo de RNA preparado (recomenda-se usar o kit da série Foregene Total RNA Isolation Kit para extrair e purificar o modelo de RNA) ou produto de quebra de amostra (recomenda-se usar o sistema Foregene Lysis), primers específicos (10 μM) e outros consumíveis relevantes, instrumento.
2. Coloque o tampão 2× Direct RT-qPCR, RNase-Free ddH2O e 20× ROX Reference Dye (se'conforme necessário) na caixa com gelo, fazendo com que estes derretam naturalmente, e misture delicadamente.
B: Preparar of RT-qPCR sistema
Mesa 1 : Preparar of RT-qPCR ssistema
| Componente | Volume | concentração final |
| 2× Buffer RT-qPCR Direto | 10 μL | 1× |
| Mistura Enzimática Direta | 1μL | |
| Primer direto (10 μM) | 0,8 μL | 50-900nM |
| Primer reverso (10 μM) | 0,8 μL | 50-900nM |
| Sonda (4 μM) | 1μL | 200nM |
| Modelo (RNA ou lisado) | X μL | |
| Corante de Referência 20×ROX | - | 1* |
| RNase-FreeddH2O | (6,4-X) μL | |
| Volume total | 20μL |
C: Definir o RT-qPCR reação programa
Mesa 2 : RT-qPCR reagion programa contexto (para exemplo: dois-etapa método)
| Etapa | Temperatura | Tempo | ciclos | Contente | |
| 1 | 50℃ | 15 minutos | 1* | 1 | Transcrição reversa |
| 2 | 95℃ | 1 minuto | 1 | Pré-desnaturação | |
| 3 | 95℃ | 10 segundos | 40-45 | Desnaturação | |
| 60℃ | 30 seg 2* | Recozimento/Extensão | |||
Armazenamento e prazo de validade
-O kit deve ser armazenado em -20± 5℃.O prazo de validade é de 12 meses.
-Evite ciclos repetidos de congelamento-descongelamento (<5 ciclos).
