Aderindo à percepção de “criar produtos de alta qualidade e fazer amigos com pessoas de todo o mundo”, colocamos constantemente o desejo dos compradores de começar por “extração total de rna”.
Aderindo ao conceito de “Criar produtos de alta qualidade e fazer amizade com pessoas de todo o mundo”, sempre colocamos o desejo dos consumidores em começar porExtração Total de Rna, Devido à boa qualidade e preços razoáveis, nossos produtos foram exportados para mais de 10 países e regiões.Estamos ansiosos para cooperar com todos os clientes em casa e no exterior.Além disso, a satisfação do cliente é a nossa eterna busca.

Descrições dos Kits

50 preparações, 200 preparações

Este kit usa a coluna giratória e a fórmula desenvolvida por nossa empresa, que pode extrair RNA total de alta pureza e alta qualidade de vários tecidos animais com alta eficiência.A coluna somente de RNA pode ligar o RNA com eficiência e pode ser processada simultaneamente com uma fórmula única. Muitas amostras.

Todo o sistema é RNase-Free, para que o RNA extraído não seja degradado;Buffer RW1, sistema de lavagem de tampão Buffer RW2, para que o RNA obtido esteja livre de poluição de proteínas, DNA, íons e compostos orgânicos.

Componentes do kit:

Características&vantagens

■ Não há necessidade de se preocupar com a degradação do RNA;todo o sistema é livre de RNase
■ Remova efetivamente o DNA usando a coluna de limpeza de DNA
■ Remova o DNA sem adicionar DNase
■ Simples - todas as operações são concluídas à temperatura ambiente
■ A operação rápida pode ser concluída em 30 minutos
■ Seguro - nenhum reagente orgânico é necessário
■ Alta pureza -OD260/280≈1,8-2,1

Kit de aplicação

É adequado para a extração e purificação de RNA total de uma variedade de tecidos animais frescos ou congelados ou células cultivadas.

Parâmetros do produto

■ Aplicações downstream: síntese de cDNA de primeira cadeia, RT-PCR, clonagem molecular, Northern Blot, etc.
■ Amostras: tecidos animais, células cultivadas
■ Dosagem: Tecidos 10-20 mg, Células (2-5) × 10⁶
■ Capacidade máxima de ligação ao DNA da coluna de purificação: 80 μg
■ Volume de eluição: 50-200 μl

fluxo de trabalho

Diagrama

Kit de isolamento de RNA total animal tratado 20mg
Amostras frescas de camundongo, colher 5% de RNA total purificado 1% de ágar

Eletroforese de glicogel
1: Baço 2: Rim
3: Fígado 4: Coração

Armazenamento e prazo de validade

O kit pode ser armazenado por 24 meses em temperatura ambiente (15–25 ℃) ou 2–8 ℃ por mais tempo.O buffer RL1 pode ser armazenado a 4 ℃ por 1 mês após a adição de β-mercaptoetanol (opcional). Aderindo à percepção de "Criar produtos de alta qualidade e fazer amigos com pessoas de todo o mundo", colocamos constantemente o desejo dos compradores de começar com o Design Renovável para Fornecedor de Produtos Químicos Orgânicos da China Álcool Isopropílico CAS 67-63-0 com Bom Preço, estamos dispostos a cooperar com amigos de negócios em casa e no exterior e criar um grande futuro juntos.
Projeto renovável para álcool isopropílico da China, fornecedor de álcool isopropílico, devido à boa qualidade e preços razoáveis, nossos produtos foram exportados para mais de 10 países e regiões.Estamos ansiosos para cooperar com todos os clientes em casa e no exterior.Além disso, a satisfação do cliente é a nossa eterna busca.

O RNA não é extraído ou os rendimentos do RNA são baixos

Muitas vezes, há uma variedade de fatores que afetam a eficiência da recuperação, como: conteúdo de RNA da amostra de tecido, método de operação, volume de eluição, etc.

1. Banho de gelo ou centrifugação criogênica (4 °C) foi realizada durante a operação.

Recomendação: Operar em temperatura ambiente (15-25°C) durante todo o processo, não tomar banho de gelo e centrifugar em baixas temperaturas.

2. Preservação inadequada da amostra ou tempo excessivo de armazenamento da amostra.

Recomendação: Armazene as amostras a -80 °C ou congele em nitrogênio líquido e evite o uso repetido de congelamento e descongelamento;tente usar tecido fresco ou células cultivadas para extração de RNA.

3. Lise insuficiente da amostra.

Recomendação: Ao homogeneizar o tecido, certifique-se de que o tecido esteja suficientemente homogeneizado e que as células do tecido estejam suficientemente divididas para explicar a liberação de RNA.

4. O eluente não foi adicionado corretamente.

Recomendação: confirme se o ddH livre de RNase₂O é adicionado gota a gota no meio da membrana da coluna de purificação.

5. O volume correto de etanol absoluto não foi adicionado ao Buffer RL2 ou Buffer RW2.

Recomendação: Siga as instruções, adicione o volume correto de etanol absoluto ao Buffer RL2 e Buffer RW2 e misture bem antes de usar o kit.

6. A dosagem da amostra de tecido não é apropriada.

Recomendação: Use 10-20 mg de tecido ou (1-5) × 10⁶células por 500 μl de tampão RL1, pois o uso excessivo de tecido pode resultar na redução da extração de RNA.

7. Volume de eluição inadequado ou eluição incompleta.

Recomendação: O volume de eluição da coluna de purificação é de 50-200 μl;se o efeito de eluição não for satisfatório, recomenda-se estender o tempo de colocação à temperatura ambiente após adicionar ddH livre de RNase pré-aquecido₂O, por exemplo, por 5-10 min.

8. A coluna de purificação contém resíduos de etanol após a lavagem com Buffer RW2.

Recomendação: Se houver resíduo de etanol após a lavagem do Buffer RW2, centrifugar o tubo vazio por 1min, o tempo para a operação de centrifugação do tubo vazio pode ser aumentado para 2min ou a coluna de purificação pode ser colocada em temperatura ambiente por 5 min para remover adequadamente o etanol residual.

O RNA purificado é degradado

A qualidade do RNA purificado está relacionada a fatores como preservação da amostra, contaminação por RNase, manipulação, etc.

1. As amostras de tecido não são mantidas no tempo.

Recomendação: Se amostras de tecido ou células não forem usadas em tempo hábil após a coleta, criopreservar imediatamente a -80 °C ou nitrogênio líquido.Para extrair o RNA, use uma amostra de tecido ou célula recém-colhida sempre que possível.

2. Congelamento-descongelamento repetido de amostras de tecido.

Recomendação: Ao armazenar as amostras de tecido, é melhor cortá-las em pequenos pedaços para preservação e remover uma das peças ao usá-las para evitar o congelamento-descongelamento repetido da amostra e a degradação do RNA.

3. A RNase é introduzida ou não usando luvas descartáveis, máscaras, etc. durante a operação.

Recomendação: os experimentos de extração de RNA são melhor realizados em salas separadas de manipulação de RNA e a mesa é limpa antes do experimento.

Use luvas e máscaras descartáveis ​​durante o experimento para minimizar a degradação do RNA causada pela introdução de RNase.

4. Os reagentes são contaminados com RNase durante o uso.

Recomendação: Substitua por um novo kit de isolamento de RNA total animal para experimentos relacionados.

5. Os tubos, ponteiras, etc. da centrífuga usados ​​na manipulação do RNA estão contaminados com RNase.

Recomendação: Confirme se os tubos de centrífuga, ponteiras, pipetas, etc. usados ​​na extração de RNA são todos livres de RNase.

O RNA obtido purificado afeta os experimentos a jusante

RNA purificado pela coluna de purificação, se os íons de sal, o teor de proteína for muito grande afetará o experimento a jusante, como: transcrição reversa, Northern Blot et al.

1. O RNA eluído contém resíduos de íons salinos.

Recomendação: Confirmar se o volume correto de etanol foi adicionado ao Buffer RW2 e realizar 2 lavagens de coluna de purificação na velocidade centrífuga indicada para operação;se houver algum resíduo de íon de sal, deixe a coluna de purificação em Buffer RW2 por 5 min em temperatura ambiente e realize a centrifugação para maximizar a remoção da contaminação de sal.

2. Resíduo de etanol no RNA eluído.

Recomendação: Confirmar que após a lavagem do tampão RW2, realizar a operação de centrifugação do tubo vazio na velocidade de centrifugação indicada para a operação, aumentar o tempo da operação de centrifugação do tubo vazio para 2 min se ainda houver resíduo de etanol, ou deixá-lo em temperatura ambiente por 5 min após a centrifugação do tubo vazio para maximizar a remoção do resíduo de etanol.