QuickEasyᵀᴹ Real Time PCR Kit-Taqman
Descrição do kit:
◮O sistema exclusivo de otimização de PCR torna 2×QuickEasyTMReal PCR Mix-Taqman mais compatível.
◮Hot-start Foregene HS Taq Polymerase tem maior eficiência de amplificação, maior sensibilidade de amplificação e maior especificidade de amplificação.
◮2× Rápido FácilTMO Real PCR Mix -Taqman usa um sistema exclusivo otimizado pela Foregene para melhorar a sensibilidade e a especificidade da detecção de sonda específica da sequência, que pode ser usada para genotipagem e determinação da variação do número de cópias e obter resultados precisos.
◮Este produto vem com o corante de referência interna ROX, que pode ser usado para eliminar o sinal de fundo e o erro de sinal entre os poços, o que é conveniente para os clientes usarem em diferentes tipos de instrumentos quantitativos de PCR.
Descrições
O 2× QuickEasyTMReal PCR Mix-Taqman fornecido pelo QuickEasyTMO kit Real Time PCR-Taqman é um sistema master mix de nova geração projetado para reação de amplificação PCR em tempo real usando sondas fluorescentes específicas.Seu núcleo Foregene HS Taq DNA Polimerase é baseado na modificação do anticorpo, usado em conjunto com o sistema de PCR otimizado adicional da Foregene, tem maior especificidade e eficiência de amplificação.Em comparação com a mistura de PCR comum, possui capacidade de amplificação mais forte e menor taxa de incompatibilidade.Pode ser usado na reação de PCR quantitativa de fluorescência para reduzir a amplificação não específica e melhorar a precisão do PCR.Pode melhorar muito a especificidade do produto e a sensibilidade da reação.Ao mesmo tempo, o ROX foi fornecido como um corante de referência interno.
O QuickEasyTMO kit Real Time PCR-Taqman tem um amplo escopo de aplicação para a quantidade de modelo e pode obter uma boa curva padrão em diferentes regiões quantitativas e pode quantificar e detectar com precisão genes alvo com boa repetibilidade e alta confiança.
Especificações
200 preparações,500 preparações,1000 preparações,2000 preparações
Componentes do kit
| Rápido FácilTMKit de PCR em tempo real-Taqman(20μlsistema) | ||||
| Conteúdo do kit | QP-01121 | QP-01122 | QP-01123 | QP-01124 |
| 200 preparações | 500 preparações | 1000 preparações | 2000 preparações | |
| 2×RápidoFácilTM PCR real Misturar-Taqman | 1 mL×2 | 1,7 mL×3 | 1,7 mL×6 | 1,7 mL×12 |
| 20×Corante de Referência ROX | 200μL | 0,5 mL | 1 mL | 1 mL×2 |
| DNase-Free ddH2O | 1,7 mL | 1,7 mL×2 | 10 mL | 20 mL |
| SE VOCÊ | 1pedaço | 1pedaço | 1pedaço | 1pedaço |
Características&vantagens
■ O sistema exclusivo de otimização de PCR torna 2×QuickEasyTMReal PCR Mix-Taqman mais compatível.
■ Hot-start Foregene HS Taq Polymerase tem maior eficiência de amplificação, maior sensibilidade de amplificação e maior especificidade de amplificação.
■ 2× Rápido FácilTM O Real PCR Mix -Taqman usa um sistema exclusivo otimizado pela Foregene para melhorar a sensibilidade e a especificidade da detecção de sonda específica da sequência, que pode ser usada para genotipagem e determinação da variação do número de cópias e obter resultados precisos.
■ Este produto vem com o corante de referência interna ROX, que pode ser usado para eliminar sinal de fundo e erro de sinal entre os poços, o que é conveniente para os clientes usarem em diferentes tipos de instrumentos quantitativos de PCR.
Kit de aplicação
■ PCR quantitativo de fluorescência para análise quantitativa do molde;
■ Camplificação por PCR convencional;
■ Pode ser usado para detecção de alelos.
Armazenamento e prazo de validade
O kit deve ser armazenado a -20°C no escuro;se for usado com frequência, também pode ser armazenado a 4°C por um curto período de tempo (consumir em 10 dias).
Princípios de design de primers de PCR em tempo real
Forward Primer e Reverse Primer
Para PCR em tempo real, o design do primer é muito importante.Os primers estão relacionados à especificidade e eficiência da amplificação por PCR e podem ser projetados com referência aos seguintes princípios:
Comprimento do primer: 18-30bp.
Conteúdo de GC: 40-60%.
Valor Tm: O software de design do primer, como o Primer 5, pode fornecer o valor Tm do primer.Os valores de Tm dos primers upstream e downstream devem ser os mais próximos possíveis.A fórmula de cálculo Tm também pode ser usada: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Ao realizar PCR, uma temperatura abaixo do valor Tm do primer de 5 °C é geralmente selecionada como a temperatura de anelamento (o aumento correspondente na temperatura de anelamento pode aumentar a especificidade da reação de PCR).
Primers e produtos de PCR:
O comprimento do produto de amplificação por PCR do primer de design é de preferência 100-150bp.
Os primers de design na área estrutural secundária do gabarito devem ser evitados tanto quanto possível.
Evite a formação de 2 ou mais bases complementares entre as extremidades 3' dos primers upstream e downstream.
A base terminal 3' do primer não pode estar presente com 3 G ou C consecutivos adicionais.
Os próprios primers não podem ter estruturas complementares, caso contrário, uma estrutura em grampo será formada, afetando a amplificação da PCR.
O ATCG deve ser distribuído o mais uniformemente possível na sequência do primer, e a base do terminal 3' deve ser evitada como T.
Apêndice 1: Pacote complementar de componentes do kit Cell Direct RT-qPCR
1.Solução de Lise Celular
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| |||
| Componentes do kit (sistema de lise de 24 poços/poço) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
| 100T | 500T | ||
| PapelEU | Tampão CL | 20ml | 100 ml |
| Foregene Protease Plus II | 400 μl | 1 ml × 2 | |
| Buffer ST | 1 ml × 2 | 10 ml | |
| PapelII | Apagador de DNA | 400 μl | 1 ml × 2 |
2.RT Mix
|
| |
| Componentes do kit (sistema de reação de 20 μl) | DRT-01011-B1 |
| 200T | |
| 5× Mix RT Direto | 800 μl |
| RNase-Free ddH2O | 1,7 ml × 2 |
|
| ||
| Componentes do kit (sistema de reação de 20 μl) | DRT-01011-C1 | DRT-01011-C2 |
| 200T | 1000T | |
| 2× Direct qPCR Mix-SYBR | 1 ml × 2 | 1,7 ml × 6 |
| Corante de referência 50× ROX | 40 μl | 200 μl |
| RNase-Free ddH2O | 1,7 ml | 10 ml |
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