Sempre pensamos e praticamos correspondendo à mudança de circunstância e crescemos.Nosso objetivo é alcançar uma mente e corpo mais ricos, bem como a vida para revendedores atacadistas de kits pré-embalados de purificação de ácido nuclear viral Rna magnético profissional, nossa empresa está atuando com o princípio do procedimento de “cooperação baseada em integridade, criada, orientada para as pessoas, cooperação ganha-ganha”.Esperamos poder ter facilmente uma parceria agradável com empresários de todo o meio ambiente.
Sempre pensamos e praticamos correspondendo à mudança de circunstância e crescemos.Nosso objetivo é a conquista de uma mente e corpo mais ricos, bem como a vida paraReagentes de DNA Rna Universal da China e Purificação Automática de Ácido Nucleico, Aspiramos a atender as demandas de nossos clientes globalmente.Nossa gama de mercadorias e serviços está em constante expansão para atender às necessidades dos clientes.Congratulamo-nos com clientes novos e antigos de todas as esferas da vida para entrar em contato conosco para futuras relações comerciais e alcançar o sucesso mútuo!
Manual de instruções:

 Sempre pensamos e praticamos correspondendo à mudança de circunstância e crescemos.Nosso objetivo é alcançar uma mente e corpo mais ricos, bem como a vida para revendedores atacadistas de kits pré-embalados de purificação de ácido nuclear viral Rna magnético profissional, nossa empresa está atuando com o princípio do procedimento de “cooperação baseada em integridade, criada, orientada para as pessoas, cooperação ganha-ganha”.Esperamos poder ter facilmente uma parceria agradável com empresários de todo o meio ambiente.
Revendedores Atacadistas deReagentes de DNA Rna Universal da China e Purificação Automática de Ácido Nucleico, Aspiramos a atender as demandas de nossos clientes globalmente.Nossa gama de mercadorias e serviços está em constante expansão para atender às necessidades dos clientes.Congratulamo-nos com clientes novos e antigos de todas as esferas da vida para entrar em contato conosco para futuras relações comerciais e alcançar o sucesso mútuo!

Guia de análise de problemas

A seguinte análise dos problemas que você pode encontrar emTotal da plantaRNA extraction will help you with your experiments. In addition, for other experimental or technical problems in addition to operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. If you have any needs, please contact us at: 028-83360257 or E-mali : Tech@foregene.com.

A coluna giratória está entupida

O bloqueio da coluna de rotação fará com que o rendimento do RNA seja reduzido ou mesmo impossibilitado de ser purificado para obter o RNA, e a qualidade do RNA obtido será baixa.

Análise de causa comum:

1. A amostra não está completamente quebrada.

A fragmentação incompleta da amostra pode bloquear a coluna de limpeza de DNA, o que também pode afetar o rendimento e a qualidade do RNA.Recomendamos que, ao realizar a fragmentação da amostra, moa rapidamente em quantidades suficientes de nitrogênio líquido para quebrar os tecidos, como paredes celulares e membranas celulares das amostras, tanto quanto possível.Para amostras de plantas de polissacarídeos de polifenol, recomendamos que você use o Plant Total RNA Isolation Kit Plus.

2. Aspire o sobrenadante isolado da coluna de limpeza de DNA e aspire o possível sedimento de detritos celulares.

O pellet de detritos celulares aspirados pode obstruir a coluna somente de RNA durante os procedimentos de adsorção de RNA (consulte a etapa 5 do procedimento, a etapa 6 do procedimento de polissacarídeo e polifenol).Recomendamos que se tome cuidado ao aspirar este sobrenadante para evitar a aspiração de detritos celulares.

3. A quantidade inicial de amostra é muito grande.

O uso excessivo de amostras resultará em fragmentação incompleta da amostra ou lise incompleta das células pelo Buffer PRL1 ou Buffer PSL1, resultando em uma coluna de purificação entupida para operações de purificação.O Plant Total RNA Isolation Kit tem um máximo inicial de 50 mg por purificação única de uma amostra operada.Para amostras de plantas de polissacarídeos de polifenol, recomendamos que você experimente o Plant Total RNA Isolation Kit Plus.

4. A temperatura da centrífuga está muito baixa.

Isolamento e purificação de RNA inteiro, exceto para ruptura de nitrogênio líquido do tecido da amostra, todas as etapas são realizadas em temperatura ambiente (20-25 ° C).Algumas centrífugas de baixa temperatura têm temperaturas abaixo de 20 °C, o que pode causar bloqueios na coluna de limpeza de DNA e/ou na coluna somente de RNA.Se isso ocorrer, ajuste a temperatura da centrífuga para 20-25 °C e pré-aqueça a mistura de lise e/ou a adição do sobrenadante de separação de etanol a 37 °C.

Nenhum RNA extraído ou o rendimento do RNA é baixo

Geralmente, existem muitos fatores que afetam a eficiência da recuperação, como: conteúdo de RNA da amostra, método de operação, volume de eluição, etc.

Análise de causas comuns como abaixo:

1.Um banho de gelo ou centrifugação a baixa temperatura (4°C) foi realizado durante a operação.

Sugestão: Operar em temperatura ambiente (15-25°C) em todo o processo, não fazer banho de gelo e centrifugação em baixa temperatura.

       2.O RNA foi degradado devido à preservação inadequada da amostra ou preservação de longo prazo da amostra.

Recomendação: Amostras coletadas recentemente devem ser rapidamente congeladas em nitrogênio líquido e, em seguida, armazenadas a -80°C por um longo período de tempo, evitar congelamento e descongelamento repetidos de amostras;ou mergulhe imediatamente as amostras em solução estabilizadora de RNA RNAlater (amostras de animais).

       3.Fragmentação insuficiente da amostra e lise levam ao bloqueio da coluna de purificação.

Sugestão: Ao moer o tecido, certifique-se de que o tecido esteja suficientemente moído e transfira-o rapidamente para o Buffer PSL1 pré-preparado (confirme se a proporção correta de β-ME foi adicionada, consulte a etapa 1 do procedimento).

4.O eluente foi adicionado incorretamente.

Sugestão: Certifique-se de que RNase-Free ddH₂O é pingado no meio da membrana da coluna de purificação.

5. O volume correto de etanol absoluto não foi adicionado ao tampão PSL2 ou tampão PRW2.

Sugestão: Siga as instruções, adicione o volume correto de etanol absoluto ao Buffer PSL2 e ao Buffer PRW2 e misture bem antes de usar o kit.

6. A quantidade de amostra de tecido é inadequada.

Sugestão: Utilizar 50 mg de tecido por 500 μl de Buffer PSL1.Usar muito tecido reduzirá a quantidade de RNA extraído e a pureza do RNA resultante também será reduzida.Recomendamos fortemente que a dosagem inicial da amostra não exceda 50 mg por operação de extração de RNA.

7. Volume de eluição inadequado ou eluição incompleta.

Sugestão: O volume do eluente da coluna de purificação é de 50-200 μl;se o efeito de eluição não for satisfatório, recomenda-se prolongar o tempo à temperatura ambiente após a adição de RNase-Free ddH pré-aquecido₂O, como 5-10min.

8. A coluna de purificação tem resíduo de etanol após lavagem com Buffer PRW2.

   Sugestão: Caso o tubo vazio seja centrifugado por 1 min e ainda reste etanol após a lavagem em Buffer PRW2, pode-se aumentar o tempo de centrifugação do tubo vazio para 2 min, ou colocar a coluna de purificação em temperatura ambiente por 5 min para remover totalmente o etanol residual.

9.O kit foi usado incorretamente.

   Sugestão: Para amostras vegetais de polissacarídeos polifenólicos, o uso de kits comuns, como o Plant Total RNA Isolation Kit, pode não ser capaz de obter amostras de RNA ideais.Recomendamos que você use Plant Total RNA IsolationKit Plus, que é especialmente projetado para amostras de plantas de polissacarídeos polifenólicos.Um kit especialmente desenvolvido para extração de RNA de amostras vegetais de polifenóis e polissacarídeos.

O valor OD260/OD280 é baixo

Eluição de RNA com ddH₂O e usado para leituras de espectrofotômetro resulta em valores baixos de OD260/OD280.Recomendamos o uso de 10 mM Tris-HCl, pH 7,5 (em vez de RNase-Free ddH₂O para eluir o RNA) para obter valores OD260/OD280 relativamente corretos, consulte “Ensaios de concentração e purificação de RNA” na página 19.

O RNA purificado é degradado

A qualidade do RNA purificado está relacionada a fatores como preservação da amostra, contaminação por RNase e manipulação.

Análise das causas comuns:

1.As amostras de tecido não foram armazenadas a tempo após a coleta.

    Recomendação: Se as amostras de tecido não forem usadas a tempo após a coleta, armazene-as imediatamente em nitrogênio líquido em baixa temperatura ou transfira-as para -80°C para armazenamento de longo prazo após congelamento rápido em nitrogênio líquido ou mergulhe imediatamente as amostras em solução estabilizadora de RNA RNAlater (amostras de animais).Para extração de RNA, tente usar amostras de tecido recém-coletadas.

2. Congelamento e descongelamento repetidos de amostras de tecido.

   Sugestão: Ao armazenar amostras de tecido, é melhor cortá-las em pedaços pequenos para preservação e retirar uma parte delas ao usá-las para evitar a degradação do RNA causada pelo congelamento e descongelamento repetidos das amostras.

3.RNase é introduzido na sala de operação ou não usa luvas descartáveis, máscaras, etc.

   Sugestão: Os experimentos de extração de RNA são melhor realizados em operações de RNA separadas, e a mesa do laboratório deve ser limpa antes do experimento, e luvas e máscaras descartáveis ​​devem ser usadas durante o experimento para evitar a degradação do RNA causada pela introdução de RNase ao máximo.

4.O reagente é contaminado por RNase durante o uso.

   Sugestão: Substitua por uma nova série de kits de extração de RNA total de plantas para experimentos relacionados.

5.Os tubos de centrífuga e as pontas de pipeta usados ​​para manipulação de RNA estão contaminados com RNase.

Sugestão: Certifique-se de que os tubos de centrífuga, pontas de pipeta, pipetas, etc. usados ​​na extração de RNA são todos RNase-Free.

Manual de instruções:

Manual de instruções do kit de isolamento de RNA total da planta