Fornecimento OEM China Rt-PCR Mix para Qpcr
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Descrições
Este kit usa um sistema de tampão de lise exclusivo que pode liberar rapidamente o RNA de amostras de células cultivadas para reações de RT-qPCR, eliminando assim o demorado e trabalhoso processo de purificação de RNA.O modelo de RNA pode ser obtido em apenas 7 minutos.Os reagentes 5×Direct RT Mix e 2×Direct qPCR Mix-SYBR fornecidos pelo kit podem obter resultados de PCR quantitativos em tempo real de forma rápida e eficaz.
5×Direct RT Mix e 2×Direct qPCR Mix-SYBR têm forte tolerância a inibidores, e o lisado das amostras pode ser usado como modelo para RT-qPCR diretamente.Este kit contém a exclusiva transcriptase reversa Foregene de alta afinidade de RNA e polimerase de DNA Hot D-Taq, dNTPs, MgCl2, tampão de reação, otimizador e estabilizador de PCR.
Especificações
200×20μl Rxns, 1000×20μl Rxns
Componentes do kit
Parte I | Tampão CL |
Foregene Protease Plus II | |
Buffer ST | |
parte II | Apagador de DNA |
5× Mix RT Direto | |
2× Direct qPCR Mix-SYBR | |
Corante de referência 50× ROX | |
DdH2O livre de RNase | |
Instruções |
Características&vantagens
■ Simples e eficaz: com a tecnologia Cell Direct RT, amostras de RNA podem ser obtidas em apenas 7 minutos.
■ A demanda de amostra é pequena, apenas 10 células podem ser testadas.
■ Alto rendimento: pode detectar rapidamente o RNA em células cultivadas em placas de 384, 96, 24, 12, 6 poços.
■ O DNA Eraser pode remover rapidamente os genomas liberados, reduzindo bastante o impacto nos resultados experimentais subseqüentes.
■ O sistema otimizado de RT e qPCR torna a transcrição reversa de RT-PCR de duas etapas mais eficiente e a PCR mais específica e mais resistente aos inibidores da reação de RT-qPCR.
Kit de aplicação
Âmbito de aplicação: células cultivadas.
- ARN libertado por lise da amostra: aplicável apenas ao modelo RT-qPCR deste kit.
- O kit pode ser utilizado para as seguintes finalidades: análise de expressão gênica, verificação do efeito de silenciamento gênico mediado por siRNA, triagem de drogas, etc.
Diagrama
Armazenamento e prazo de validade
A parte I deste kit deve ser armazenada a 4℃;A Parte II deve ser armazenada a -20℃.
Foregene Protease Plus II deve ser armazenado a 4 ℃, não congelar a -20 ℃.
Reagente 2×Direct qPCR Mix-SYBR deve ser armazenado a -20℃ no escuro;se usado com frequência, também pode ser armazenado a 4 ℃ para armazenamento de curto prazo (use em 10 dias).qpcr, Cooperação sincera com você, desenvolverá um amanhã feliz!
Fornecimento OEMChina Taq DNA Polimerase, Qpcr, Agora, fornecemos profissionalmente aos clientes nossas principais soluções E nosso negócio não é apenas “comprar” e “vender”, mas também focar em mais.Nosso objetivo é ser seu fornecedor leal e colaborador de longo prazo na China.Agora, esperamos ser os amigos com você.
Princípios de design de primers de PCR em tempo real
Forward Primer e Reverse Primer
Para PCR em tempo real, o design do primer é muito importante.Os primers estão relacionados à especificidade e eficiência da amplificação por PCR e podem ser projetados com referência aos seguintes princípios:
Comprimento do primer: 18-30bp.
Conteúdo de GC: 40-60%.
Valor Tm: O software de design do primer, como o Primer 5, pode fornecer o valor Tm do primer.Os valores de Tm dos primers upstream e downstream devem ser os mais próximos possíveis.A fórmula de cálculo Tm também pode ser usada: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Ao realizar PCR, uma temperatura abaixo do valor Tm do primer de 5 °C é geralmente selecionada como a temperatura de anelamento (o aumento correspondente na temperatura de anelamento pode aumentar a especificidade da reação de PCR).
Primers e produtos de PCR:
O comprimento do produto de amplificação por PCR do primer de design é de preferência 100-150bp.
Os primers de design na área estrutural secundária do gabarito devem ser evitados tanto quanto possível.
Evite a formação de 2 ou mais bases complementares entre as extremidades 3' dos primers upstream e downstream.
A base terminal 3' do primer não pode estar presente com 3 G ou C consecutivos adicionais.
Os próprios primers não podem ter estruturas complementares, caso contrário, uma estrutura em grampo será formada, afetando a amplificação da PCR.
O ATCG deve ser distribuído o mais uniformemente possível na sequência do primer, e a base do terminal 3' deve ser evitada como T.
Apêndice 1: Pacote complementar de componentes do kit Cell Direct RT-qPCR
1.Solução de Lise Celular
| |||
Componentes do kit (sistema de lise de 24 poços/poço) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100T | 500T | ||
PapelEU | Tampão CL | 20ml | 100 ml |
Foregene Protease Plus II | 400 μl | 1 ml × 2 | |
Buffer ST | 1 ml × 2 | 10 ml | |
PapelII | Apagador de DNA | 400 μl | 1 ml × 2 |
2.RT Mix
| |
Componentes do kit (sistema de reação de 20 μl) | DRT-01011-B1 |
200T | |
5× Mix RT Direto | 800 μl |
RNase-Free ddH2O | 1,7 ml × 2 |
| ||
Componentes do kit (sistema de reação de 20 μl) | DRT-01011-C1 | DRT-01011-C2 |
200T | 1000T | |
2× Direct qPCR Mix-SYBR | 1 ml × 2 | 1,7 ml × 6 |
Corante de referência 50× ROX | 40 μl | 200 μl |
RNase-Free ddH2O | 1,7 ml | 10 ml |