Lnc-RT Heroᵀᴹ I(Com gDNase)(Super Premix para síntese de cDNA de primeira cadeia a partir de lncRNA)
Especificações
25×20μl Rxns, 50×20μl Rxns
Lnc-RT HeroTM I (Com gDNase) é um sistema de transcrição reversa especialmente desenvolvido para lncRNA para remover rapidamente a contaminação do DNA genômico.O 5×gDNase Mix pode remover rapidamente o genoma restante no RNA a 42°C por 2 minutos, evitando efetivamente a interferência do genoma nos resultados do qPCR.
5×L-RT HeroTM Mix contém Foregene LncRNA Reverse Transcriptase especialmente desenvolvido pela Foregene, que é um novo tipo de transcriptase reversa especificamente para lncRNA e outros modelos complexos de RNA longos, com afinidade de RNA mais forte e maior eficiência de gravação reversa.O sistema otimizado torna a taxa de transcrição reversa mais rápida e pode facilmente transcrever modelos de RNA com alto conteúdo de GC e estrutura secundária complexa.A síntese da primeira fita de cDNA pode ser concluída a 42°C em 15 minutos.
Componentes do kit
| 5× Mistura de gDNase |
| 5× L-RT HeroTM Mix |
| DdH2O livre de RNase |
| Instruções |
Características&vantagens
■Capacidade eficiente de remover gDNA, que pode remover gDNA no modelo em 2 minutos.
■ Pode reverter eficientemente a transcrição do lncRNA.Quando o produto da transcrição reversa é submetido a qPCR, o valor Ct é menor do que o do sistema convencional de transcrição reversa.
■ Sistema de transcrição reversa eficiente, leva apenas 15 minutos para completar a síntese da primeira fita de cDNA.
■ Modelos complexos: modelos com alto conteúdo de GC e estrutura secundária complexa também podem ser revertidos com alta eficiência.
■ Sistema de transcrição reversa de alta sensibilidade, modelos de nível pg também podem obter cDNA de alta qualidade.
■ O sistema de transcrição reversa tem alta estabilidade térmica, a temperatura de reação ideal é 42℃, e ainda tem um bom desempenho de transcrição reversa em 50℃.
Kit de aplicação
Análise quantitativa relativa de lncRNA.
Análise quantitativa absoluta de lncRNA.
Ele pode analisar com rapidez e precisão traços de RNA, como vírus de RNA.
Transcrição reversa de modelos de RNA com alto conteúdo de GC ou estrutura secundária complexa.
fluxo de trabalho
Armazenamento e prazo de validade
O kit deve ser armazenado a -20°C. Armazene o produto em um refrigerador de temperatura constante a -20°C imediatamente após o recebimento.Se as condições de armazenamento forem apropriadas, o produto não degradará nenhum desempenho durante o período de validade de 1 ano.
Guia de análise de problemas
The following is an analysis of the problems that may be encountered in the use of Lnc-RT HeroTM I (With gDNase) series kits, hoping to be helpful to your experiments. In addition, we have dedicated technical support to help you with other experimental or technical problems beyond the operating instructions and questions. If you have any needs, please contact us: 028-83361257 or E-mail: Tech@foregene.com.
Non-amplificação específica
1. Design de primer irracional
Recomendação: Projetar primers de acordo com os princípios de design de primers.
2. Resíduos do genoma.
Sugestão: Certifique-se de que a primeira etapa da temperatura da reação de remoção do gDNA seja de 42°C, e o tempo de reação também pode ser estendido para 5min.
Nenhum sinal de amplificação por RT-qPCR
1. O RNA é degradado.
Recomendação: O material para extração de RNA deve ser o mais fresco possível, devendo ser utilizado RNA de alta qualidade e pureza.
2. O RNA contém inibidores.
Recomendação: Os inibidores da transcrição reversa geralmente incluem SDS, sais de guanidina, EDTA, etc. Recomenda-se lavar o precipitado de RNA com etanol 70% para remover os inibidores.
3. Problemas de design do primer.
Recomendação: De acordo com o princípio de design do primer, redesenhe os primers para inspeção.
A banda de destino aparece no controle em branco
1. Contaminação de ferramentas operacionais ou reagentes.
Recomendação: Todos os reagentes ou equipamentos para o experimento devem ser autoclavados.Tenha cuidado e delicadeza ao manusear para evitar que as amostras de DNA sejam sugadas para dentro da pipeta ou derramadas para fora do tubo da centrífuga.
2. Ocorreu contaminação durante a preparação do sistema de reação de PCR.
Recomendação: Tomar os cuidados necessários no manuseio, tais como: usar luvas de látex, usar ponteiras com filtro.Use o Real Time PCR Mix em um sistema à prova de contaminação.
3. Os primers estão degradados.
Sugestão: Use eletroforese SDS-PAGE para detectar se os primers estão degradados e substitua por novos primers para experimentos de detecção de fluorescência.
Manual de instruções:
