Fabricante da China para pré-mistura concentrada 2× para amostra não purificada PCR quantitativo em tempo real Multiplex direto Sonda Qpcr Mix Plus U
A organização mantém o conceito de procedimento “gerenciamento científico, alta qualidade e primazia de eficiência, comprador supremo para o fabricante da China para pré-mistura concentrada 2 × para amostra não purificada PCR quantitativo em tempo real, sonda multiplex direta Qpcr Mix Plus U, nosso negócio é dedicado a oferecer aos clientes produtos de alta qualidade significativos e seguros a preços agressivos, deixando cada cliente satisfeito com nossos serviços.
A organização mantém o conceito de procedimento “gestão científica, primazia de alta qualidade e eficiência, comprador supremo paraChina Taq DNA Polimerase e Qpcr, Nossa empresa tem força abundante e possui um sistema de rede de vendas estável e perfeito.Desejamos poder estabelecer relações comerciais sólidas com todos os clientes nacionais e estrangeiros com base em benefícios mútuos.
Princípios de design de primers de PCR em tempo real
Forward Primer e Reverse Primer
Para PCR em tempo real, o design do primer é muito importante.Os primers estão relacionados à especificidade e eficiência da amplificação por PCR e podem ser projetados com referência aos seguintes princípios:
- Comprimento do primer: 18-30bp.
- Conteúdo de GC: 40-60%.
- Valor Tm: O software de design do primer, como o Primer 5, pode fornecer o valor Tm do primer.Os valores de Tm dos primers upstream e downstream devem ser os mais próximos possíveis.A fórmula de cálculo Tm também pode ser usada: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Ao realizar PCR, uma temperatura abaixo do valor Tm do primer de 5 °C é geralmente selecionada como a temperatura de anelamento (o aumento correspondente na temperatura de anelamento pode aumentar a especificidade da reação de PCR).
- Primers e produtos de PCR:
- O comprimento do produto de amplificação por PCR do primer de design é de preferência 100-150bp.
- Os primers de design na área estrutural secundária do gabarito devem ser evitados tanto quanto possível.
- Evite a formação de 2 ou mais bases complementares entre as extremidades 3' dos primers upstream e downstream.
- A base terminal 3' do primer não pode estar presente com 3 G ou C consecutivos adicionais.
- Os próprios primers não podem ter estruturas complementares, caso contrário, uma estrutura em grampo será formada, afetando a amplificação da PCR.
- O ATCG deve ser distribuído o mais uniformemente possível na sequência do primer, e a base do terminal 3' deve ser evitada como T.
Apêndice1:Cell diretoRT-qPCR Kit de componentest pacote de suplemento
1.Solução de Lise Celular
Solução de Lise Celular | |||
Componentes do kit (sistema de lise de 24 poços/poço) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100T | 500T | ||
PapelEU | Tampão CL | 20ml | 100 ml |
Foregene Protease Plus II | 400 μl | 1 ml × 2 | |
Buffer ST | 1 ml × 2 | 10 ml | |
PapelII | Apagador de DNA | 400 μl | 1 ml × 2 |
RT Mix | |
Componentes do kit (sistema de reação de 20 μl) | DRT-01011-B1 |
200T | |
5× Mix RT Direto | 800 μl |
RNase-Free ddH2O | 1,7 ml × 2 |
mistura qPCR | ||
Componentes do kit (sistema de reação de 20 μl) | DRT-01021-C1 | DRT-01021-C2 |
200T | 1000T | |
2× Direct qPCR Mix-Taqman | 1 ml × 2 | 1,7 ml × 6 |
Corante de referência 20× ROX | 40 μl | 200 μl |
RNase-Free ddH2O | 1,7 ml | 10 ml |
A organização mantém o conceito de procedimento “gerenciamento científico, alta qualidade e primazia de eficiência, comprador supremo para o fabricante da China para pré-mistura concentrada 2 × para amostra não purificada PCR quantitativo em tempo real, sonda multiplex direta Qpcr Mix Plus U, nosso negócio é dedicado a oferecer aos clientes produtos de alta qualidade significativos e seguros a preços agressivos, deixando cada cliente satisfeito com nossos serviços.
Fabricante da China paraChina Taq DNA Polimerase e Qpcr, Nossa empresa tem força abundante e possui um sistema de rede de vendas estável e perfeito.Desejamos poder estabelecer relações comerciais sólidas com todos os clientes nacionais e estrangeiros com base em benefícios mútuos.
Princípios de design de primers de PCR em tempo real
Forward Primer e Reverse Primer
Para PCR em tempo real, o design do primer é muito importante.Os primers estão relacionados à especificidade e eficiência da amplificação por PCR e podem ser projetados com referência aos seguintes princípios:
- Comprimento do primer: 18-30bp.
- Conteúdo de GC: 40-60%.
- Valor Tm: O software de design do primer, como o Primer 5, pode fornecer o valor Tm do primer.Os valores de Tm dos primers upstream e downstream devem ser os mais próximos possíveis.A fórmula de cálculo Tm também pode ser usada: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Ao realizar PCR, uma temperatura abaixo do valor Tm do primer de 5 °C é geralmente selecionada como a temperatura de anelamento (o aumento correspondente na temperatura de anelamento pode aumentar a especificidade da reação de PCR).
- Primers e produtos de PCR:
- O comprimento do produto de amplificação por PCR do primer de design é de preferência 100-150bp.
- Os primers de design na área estrutural secundária do gabarito devem ser evitados tanto quanto possível.
- Evite a formação de 2 ou mais bases complementares entre as extremidades 3' dos primers upstream e downstream.
- A base terminal 3' do primer não pode estar presente com 3 G ou C consecutivos adicionais.
- Os próprios primers não podem ter estruturas complementares, caso contrário, uma estrutura em grampo será formada, afetando a amplificação da PCR.
- O ATCG deve ser distribuído o mais uniformemente possível na sequência do primer, e a base do terminal 3' deve ser evitada como T.
Apêndice1:Cell diretoRT-qPCR Kit de componentest pacote de suplemento
1.Solução de Lise Celular
Solução de Lise Celular | |||
Componentes do kit (sistema de lise de 24 poços/poço) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100T | 500T | ||
PapelEU | Tampão CL | 20ml | 100 ml |
Foregene Protease Plus II | 400 μl | 1 ml × 2 | |
Buffer ST | 1 ml × 2 | 10 ml | |
PapelII | Apagador de DNA | 400 μl | 1 ml × 2 |
RT Mix | |
Componentes do kit (sistema de reação de 20 μl) | DRT-01011-B1 |
200T | |
5× Mix RT Direto | 800 μl |
RNase-Free ddH2O | 1,7 ml × 2 |
mistura qPCR | ||
Componentes do kit (sistema de reação de 20 μl) | DRT-01021-C1 | DRT-01021-C2 |
200T | 1000T | |
2× Direct qPCR Mix-Taqman | 1 ml × 2 | 1,7 ml × 6 |
Corante de referência 20× ROX | 40 μl | 200 μl |
RNase-Free ddH2O | 1,7 ml | 10 ml |
Manual de instruções: