Introdução:

Moléculas de RNA podem interagir extensivamente com outras moléculas biológicas, como proteínas, DNA e RNA, e assim existem em células e organismos na forma de complexos macromoleculares.Entre eles, os complexos RNA-proteína são a existência e a função do RNA Uma das formas importantes de.O RNA pull-down é um método clássico para triagem e identificação de moléculas de RNA, especialmente as proteínas de interação das moléculas de lncRNA, e é reconhecido pela maioria dos pesquisadores e revistas acadêmicas internacionais.Hoje o FORREGENE compartilhará com você o princípio experimental e o processo técnico do RNA pull-down, talvez você possa usá-lo

1. O princípio experimental da tecnologia de pull down de RNA:

Transcrição e síntese in vitro de lncRNA alvo marcado com biotina ou fragmentos de lncRNA (incluindo fragmentos de RNA usados ​​como controles positivos e negativos) e incubação com extratos celulares;use grânulos magnéticos ancorados em avidina para coletar proteínas de RNA ou complexos de RNA-RNA. Após lavagem completa, o complexo é eluído.Se detectar a molécula de proteína alvo que interage com o lncRNA, execute a eletroforese de proteínas no produto de extração de RNA, detecte a proteína alvo por coloração de prata e corte o gel para espectrometria de massa;também executa diretamente a verificação de western blot no produto pull-down;se detectado Para moléculas-alvo de RNA que interagem com lncRNA, os produtos de extração de RNA são submetidos à extração de RNA e a detecção específica de qRT-PCR é realizada.

2. Processo de experimento de tecnologia de pull down de RNA:

3. Serviço técnico para pull down de RNA de FOREGENE:

Cultura de células

Preparação de extrato de proteína celular total/nuclear/plasmática

Experimento suspenso de RNA

Eletroforese SDS-PAGE, coloração de prata

Espectrometria de massa e experimentos WB

relatório experimental

4. Caso experimental

A figura a seguir mostra os resultados do pull down de RNA do FJ Bio-Bio e da detecção de eletroforese SDS-PAGE, em que a seta vermelha marca a banda de diferença:

O grupo de pesquisa do professor Song Xu, da Universidade de Sichuan, acumulou 15 anos de acúmulo de longo prazo no campo da pesquisa de lncRNA.Foregene Bio e o grupo de pesquisa do professor Song Xu cooperaram para lançar a tecnologia de extração de RNA do lncRNA, que lhe dará um resultado satisfatório para seu experimento.