O nascimento do PCR
PCR (Reação em Cadeia da Polimerase)
Já se passaram mais de 30 anos desde a invenção da reação em cadeia da polimerase.Por mais de 30 anos, após numerosos estudiosos em todo o mundo continuarem a complementar e melhorar, a tecnologia de PCR tornou-se o método de pesquisa básica mais amplamente utilizado e mais importante em todo o campo das Ciências da Vida.
O TouchDown PCR, Real-Time PCR, Multi PCR, etc. desenvolvidos com base na ampla aplicação da tecnologia tradicional de PCR, bem como o recém-emergido Digital PCR (PCR digital), enriqueceram muito os métodos de pesquisa da maioria dos pesquisadores científicos e aceleraram muito o processo de desenvolvimento das ciências da vida modernas, especialmente a biologia molecular, fez grandes contribuições para o estudo da vida e da natureza da humanidade como um todo.
Defeitos da tecnologia PCR tradicional
Separação de ácidos nucleicos complexos eExtração:
★ Tecnologia de PCR tradicional: necessária
★ Tecnologia derivada de PCR: necessária
★ Amostras de DNA e RNA: grandes diferenças, requisitos de operação difíceis
★ Perigos para o corpo: reagentes tóxicos prejudicam o corpo
A tecnologia de PCR tradicional e a tecnologia derivada têm um pré-requisito de separação e purificação de ácidos nucleicos
Qualquer amostra biológica precisa passar por uma série de processamentos de amostras complicados e tediosos para obter amostras de ácido nucleico que atendam aos requisitos da tecnologia de PCR.
A separação e extração de DNA e RNA sempre foi uma tarefa básica que pesquisadores científicos relevantes precisam repetir todos os dias.
Devido às enormes diferenças entre as amostras, os processos de separação e extração de DNA e RNA também são muito diferentes.Este trabalho requer um alto nível de proficiência técnica para os operadores.As técnicas tradicionais de separação e extração requerem contato prolongado com alguns reagentes químicos altamente tóxicos.Isso causará danos irreversíveis ao corpo do operador e até causará danos diretos durante o experimento.
Ao mesmo tempo, para quem tem um grande número de amostras para estudar, a separação e extração de ácidos nucléicos é uma tarefa trabalhosa.
Os kits de isolamento e extração de ácido nucleico no mercado já estão maduros e existem muitas marcas, mas são praticamente os mesmos.Seja um kit centrífugo de coluna de membrana de sílica gel ou um kit de método de esfera magnética, leva muito tempo e é caro.Além do custo do kit, também existem requisitos especiais para equipamentos de laboratório.A estação de trabalho automatizada usada no método de esfera magnética é um equipamento típico de grande escala e alto valor, o que representa uma despesa enorme para o laboratório.
Resumindo
Antes de realizar experimentos de PCR, o pré-tratamento de amostras é uma dor de cabeça inevitável e sempre para os pesquisadores.Como resolver este problema e se experimentos de PCR podem ser realizados sem a separação e extração de ácidos nucléicos sempre foi o pensamento da maioria dos pesquisadores científicos e pessoal de laboratório clínico.
Solução de Foregene
Após anos de pesquisa meticulosa sobre a tecnologia de PCR direto e kits relacionados, a Forgene rompeu com sucesso muitos gargalos e alcançou com sucesso PCR direto para muitos tipos de amostras diferentes com forte resistência e adaptabilidade, permitindo que os pesquisadores se livrassem da separação e extração incômodas e perigosas de ácidos nucléicos.Isso reduzirá bastante a intensidade de trabalho de todos, acelerará o processo de experimento e economizará custos de pesquisa e teste científicos.
Compreensão e conhecimento da Forgene sobre DirectPCR
Primeiro, a tecnologia DirectPCR é uma tecnologia de PCR direta para vários tecidos de amostras biológicas.Nesta condição técnica, não há necessidade de separar e extrair ácidos nucléicos, e a amostra de tecido é usada diretamente como objeto, e os primers do gene alvo são adicionados para a reação de PCR.
Em segundo lugar, a tecnologia DirectPCR não é apenas uma tecnologia tradicional de amplificação de modelo de DNA, mas também inclui PCR de transcrição reversa de modelo de RNA.
Em terceiro lugar, a tecnologia DirectPCR não apenas executa diretamente reações de PCR qualitativas de rotina em amostras de tecido, mas também inclui reações qPCR em tempo real, o que requer que o sistema de reação tenha uma forte capacidade de resistir à interferência de fluorescência de fundo e antagonizar os extintores de fluorescência endógenos.
Em quarto lugar, as amostras de tecido visadas pela tecnologia DirectPCR requerem apenas a liberação de modelos de ácido nucleico e não removem proteínas, polissacarídeos, íons de sal, etc. que interferem na reação de PCR.Isso requer que a polimerase de ácido nucleico e a mistura de PCR no sistema de reação tenham excelente anti-reversibilidade e adaptabilidade e possam garantir a atividade da enzima e a precisão da replicação em condições complexas.
Quinto, as amostras de tecido visadas pela tecnologia DirectPCR não foram submetidas a nenhum tratamento de enriquecimento de ácido nucleico e a quantidade de molde é muito pequena, o que requer sensibilidade extremamente alta e eficiência de amplificação do sistema de reação.
Conclusão
A tecnologia DirectPCR é um dos mais importantes desenvolvimentos tecnológicos e inovações nos últimos 30 anos desde o nascimento da tecnologia PCR.A Forgene foi e continuará a ser pioneira e inovadora dessa tecnologia.
A perspectiva de aplicação da tecnologia DirectPCR é muito ampla.A melhoria contínua e a promoção dessa tecnologia certamente trarão mudanças subversivas na pesquisa científica e no trabalho de inspeção.Esta é uma revolução da tecnologia PCR.
Horário da postagem: 21 de fevereiro de 2017