Introdução:
O RNA, nome científico ácido ribonucleico, sua abreviação vem de Ácido RiboNucleico, é um tipo de ácido nucleico formado pela ligação de pelo menos dezenas de ribonucleotídeos através de ligações fosfodiéster.
A premissa de explorar o RNA é extrair RNA total livre de poluição, e o princípio básico da extração de RNA pode ser resumido da seguinte forma:
1. Interrompa as células primeiro
2. Em seguida, remova as impurezas macromoleculares (proteínas, lipídios, DNA, etc.)
3. Finalmente, o RNA é precipitado durante a remoção de sais e solventes orgânicos e posterior purificação do RNA
Passado e presente do método de extração
A primeira geração do método de extração de RNA é o método de precipitação TRIzol (reagentes usados incluem isotiocianato de guanidina, fenol, clorofórmio, etc.)
Mais tarde, o vovô vendeu essa patente para a Invitrogen, e a Invitrogen promoveu esse método para o mundo e se tornou um método amplamente utilizado.
Mais tarde, a Invitrogen foi adquirida pela Thermo!
Produto representativo: reagente TRIzol da Invitrogen
No entanto, o método de precipitação TRIzol requer precipitação múltipla e extração de RNA, e os reagentes utilizados são tóxicos e demoram muito tempo para operar.
Portanto, surgiu o método de purificação de enzima de coluna de segunda geração, usando membrana de sílica gel como um material de adsorção de ácido nucleico específico para maximizar a recuperação de RNA na amostra enquanto remove outras impurezas.
O método de segunda geração simplifica a operação com base no desempenho estável, reduz o fator de risco e melhora a eficiência da extração de RNA.
Produtos representativos: QIAGEN RNeasy e a maioria dos produtos domésticos
No entanto, os métodos de primeira e segunda geração requerem o uso de DNase para remover a contaminação do DNA, o que traz alguns inconvenientes para experimentos subsequentes a jusante.A DNase residual reduzirá a eficiência da transcrição reversa e reduzirá a síntese da primeira cadeia de cDNA, afetando assim a precisão dos resultados.
Portanto, o método de extração de terceira geração é otimizado com base na segunda geração.O experimento não precisa adicionar nenhuma enzima, e o RNA pode ser facilmente obtido com apenas duas colunas.
Coluna 1: Coluna de limpeza de DNA para limpar o DNA
Coluna 2: A coluna somente de RNA adsorve e recupera especificamente o RNA
Uma operação tão simples não apenas economiza tempo, mas também facilita a operação de experimentos a jusante!
Produtos representativos: QIAGEN RNeasy Plus eForegeneProdutos da série de purificação de RNA
(RNeasy Plus)
(de ForegeneKit de isolamento de RNA total da planta)
Diga-lhe calmamente!O kit de RNA da Foregene também apresenta um RNase Eraser super fácil de usar, que pode remover completamente 400μg de RNase na superfície sólida em 1 minuto, sem adicionar nenhuma substância tóxica ao corpo humano!
Foto1: Gráfico de comparação do processo operacional
Os produtos da Foregene podem completar a extração de RNA em apenas duas músicas, não deixe os outros com inveja do progresso do seu experimento!
Foto2:Eresultados experimentais gráfico de comparação
A primeira geração (1: TRIzol)
A segunda geração (2: RNeasy da QIAGEN)
A terceira geração (3: RNeasy plus da QIAGEN, 4: Foregene)
Foto3: gráfico qPCR (gráfico da curva de amplificação)
A primeira geração (verde significa TRIzol -, vermelho significa TRIzol +)
A segunda geração (céu azul significa QIAGEN RNeasy-, vermelho significa QIAGEN RNeasy +)
A terceira geração (azul significa QIAGEN RNeasy plus, verde significa Foregene)
(Observação: o gráfico qPCR “-” indica que a DNase não foi adicionada e a contaminação do DNA não foi removida. Portanto, o CT é maior e o resultado não é preciso; “+” indica que a DNase foi adicionada e a contaminação do DNA foi removida, o resultado é preciso)
Cada atualização técnica significa que a operação do experimento está se desenvolvendo em uma direção mais simples e amigável.
A Foregene visa ajudar mais pesquisadores científicos a economizar tempo e custos experimentais, obter resultados experimentais de alta qualidade e criar conjuntamente realizações de pesquisa científica mais valiosas.
Horário da postagem: 09 de julho de 2021